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吖啶橙AO/EB双荧光染色试剂盒

吖啶橙能透过胞膜完整的细胞,嵌入细胞核DNA,与双链DNA结合后发出绿色荧光,溴化乙锭(EB)仅能透过胞膜受损的细胞,嵌入核DNA,发橘红色荧光。凋亡的细胞呈现为染色增强,荧光更为明亮,均匀的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅不一的结构样特征。二者很容易判别。在荧光显微镜下观察,可见四种细胞形态:活细胞(VN),核染色质着绿色并呈正常结构;早期凋亡细胞(VA),核染色质着绿色呈固缩状或圆珠状;晚期凋亡细胞(NVA),核染色质为橘红色并呈固缩状或圆珠状;非凋亡的死亡细胞(NVN),核染色质着橘红色并呈正常结构。
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产品编号
216-500mL(1000元)
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产品描述
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吖啶橙AO/EB双荧光染色试剂盒

吖啶橙(Acridine Orange), 属于三环杂芳香燃料,可以标记DNA、RNA,属于异染性荧光染料,AO常用于细胞内DNA和RNA进行检测。AO与核酸结合方式主要有:1、插入性结合,AO嵌入核酸双链的碱基对之间,这种结合方式主要为AO与DNA的结合,其荧光发射峰为530nm,激发后呈绿色荧光,其荧光发射峰为640nm,激发后呈红色荧光,少量结合会呈桔黄色或桔红色荧光。因此,AO嵌合到双链DNA分子中显绿色,与DNA单链或RNA结合时发橙红色荧光。Ethidium Bromide嵌合到双链DNA或RNA的碱基对中,无碱基特异性,发红色荧光。

吖啶橙能透过胞膜完整的细胞,嵌入细胞核DNA,与双链DNA结合后发出绿色荧光,溴化乙锭(EB)仅能透过胞膜受损的细胞,嵌入核DNA,发橘红色荧光。凋亡的细胞呈现为染色增强,荧光更为明亮,均匀的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅不一的结构样特征。二者很容易判别。在荧光显微镜下观察,可见四种细胞形态:活细胞(VN),核染色质着绿色并呈正常结构;早期凋亡细胞(VA),核染色质着绿色呈固缩状或圆珠状;晚期凋亡细胞(NVA),核染色质为橘红色并呈固缩状或圆珠状;非凋亡的死亡细胞(NVN),核染色质着橘红色并呈正常结构。本产品所含稳定剂不影响实验效果。


吖啶橙(AO)-EB双染色试剂盒使用方法:(仅供参考)
 使用前先根据用量,将AO溶液和EB溶液按1:1混合成工作液,先用现配。
  a)对于贴壁细胞或爬片,去掉培养基,用PBS洗两遍去除残余培养基和未贴壁细胞,加入新的PBS;如果需要观察全部细胞特性,保留未贴壁细胞,可以直接在培养基中加入工作液。按照每毫升培养基或PBS中加入20uL工作液即可。室温放置2-5min后于荧光显微镜下观察。
  b)对于悬浮细胞,可直接加入工作液或离心收集细胞后在PBS中加入工作液。按照每毫升培养基或PBS中加入20uL工作液即可。室温放置2-5min后于荧光显微镜下观察。

 

染色结果:

活细胞

绿色荧光

死细胞

橙色荧光

 

吖啶橙(AO)-EB双染色试剂盒注意事项:

 

1. 用能通过活细胞膜与DNA结合后发蓝色荧光的Hoechist 33342和只能通过死细胞与DNA结合后发红色荧光的propidium iodide对细胞进行双染的方法也比较常用。

2. 如有低温离心机进行离心效果更佳。

3. 操作过程中应注意减少染色溶液暴露于强光下的时间。

4. 含酚红培养基对观察有轻微影响。建议使用无酚红培养基。

5. 染色液工作浓度和染色时间可根据具体实验情况适当调整,以期达到佳效果。

6. EB 和吖啶橙(Acridine Orange)有一定毒性,请小心操作。

所有产品仅限用于研发,必须由专业技术人员操作同时佩戴口罩/手套/实验服并遵守生物实验室安全操作规程!

有效期: 4度密封避光12个月有效。

 

产品参数

Name 吖啶橙AO/EB双荧光染色试剂盒
CAT# 216 CAS#  
Storage# 4°C Sealed & desiccated & Minimized light exposure & Minimized Freezing And Thawing Shelf Life# 24 months
Ex(nm)#   Em(nm)#  
MW#   Solvent# Water

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