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PEI转染试剂

线性化聚乙烯亚胺 PEI转染试剂是一种高电荷阳离子聚合物,非常容易结合带负电荷的核酸分子,形成复合物, 并使该复合物进入细胞中。该转染试剂是一种瞬时转染试剂,细胞毒性低,转染效率高,在 293 和 CHO 等细胞中基因表达效率较高。目前已经验证线性 PEI 转染试剂广泛适用于多种细胞系包括 293、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3、Sf9、HepG2 和 Hela 细胞等。该试剂与含血清的培养基兼容,能高效的将核酸导入细胞。
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产品编号
031-PEI 10mL/1000元;50mL/3000元
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-
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1
产品描述
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PEI Transfection Reagent  转染试剂 (高效低毒)

产品简介:

线性化聚乙烯亚胺 PEI转染试剂是一种高电荷阳离子聚合物,非常容易结合带负电荷的核酸分子,形成复合物, 并使该复合物进入细胞中。该转染试剂是一种瞬时转染试剂,细胞毒性低,转染效率高,在 293 和 CHO 等细胞中基因表达效率较高。目前已经验证线性 PEI 转染试剂广泛适用于多种细胞系包括 293、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3、Sf9、HepG2 和 Hela 细胞等。该试剂与含血清的培养基兼容,能高效的将核酸导入细胞。

产品储存: -20℃保存两年。(4 °C保存有效期1年,不可重新冻存!)

使用方法: DNA的转染  6 孔板为例

1. 接种细胞:为了提高转染效率,建议在转染前一天接种细胞,以转染时细胞密度在 70%~80%为宜。

2. 准备 DNA-PEI 复合物:按照以下体系配制 DNA-PEI 核酸-转染试剂复合物:

1) 对于每孔细胞,使用 100 μL 无血清培养基稀释 2 μg 目的DNA ,充分混匀成 DNA 稀释液。

【注】:无血清稀释液建议采用 Opti-MEM 或ddH2O

2) 立刻向 100 μL 的 DNA 稀释液中加入 5 μL 的PEI转染试剂,旋涡 10 秒,充分混匀。

3) 在室温下孵育 10~25 min,使得形成 DNA-PEI 阳离子核酸转染试剂复合物。

3. 转染细胞:

1) 在形成复合物过程中,移除细胞生长培养基,每孔中加入 2 mL 新鲜预热的完全培养基。

2) 直接将 100 μL DNA-PEI 核酸-PEI 复合物加入细胞中,摇动培养板,轻轻混匀。

3)37 ℃,5% CO2 培养箱培养,转染后最快 7 h 即可检测到转入基因的表达。请自行确定适合检测时间。

4. 稳转筛选(可选)

转染 24 h 后,将细胞传代至新鲜的生长培养基中(将细胞稀释 10 倍以上),37 ℃,5% CO2 培养箱孵育过夜。第二天加入与转染抗性基因相匹配的筛选药物。约 1~2 周可筛选到耐药性克隆,在这期间需经常更换含筛选药物的生长培养基。

 

不同细胞培养容器转染用量(仅供参考)

培养皿

表面积(cm2

DNA 的量(μg)

转染试剂的量(μL)

稀释液体积(μL)

培养基总量

96 孔板

0.3

0.1

0.1

10

100 μL

48 孔板

0.7

0.2

0.3

20

200 μL

24 孔板

1.9

0.5

1

50

500 μL

12 孔板

3.8

1

2

50

1mL

孔板

10

2

4

100

2 mL

25cm2 培养瓶

21

4

8

200

4 mL

75cm2 培养瓶

58

10

20

500

10 mL

 

注意事项

1) 配置好的 PEI 溶液从-20 ºC 拿出融化后,可放在 4 ºC 冰箱保存,绝不可重新冻存。

2) 对大多数细胞每1μg DNA3.0 μL PEI 转染试剂。也可以1μg DNA 使用 1.5~4 μL PEI 转染试剂进行优化。

3) 本公司所有产品仅限于专业人员用于生命科学研究,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅。

4) 本公司所有产品必须由合格专业技术人员操作同时佩戴口罩/手套/实验服并遵守生物实验室安全操作规程!

 

产品参数

Name PEI转染试剂
CAT#   CAS#  
Storage# 4°C Sealed & desiccated & Minimized light exposure & Minimized Freezing And Thawing! Shelf Life# 24 months
Ex(nm)#   Em(nm)#  
MW#   Solvent#  


 

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