中文 | EN
PKH26红色荧光细胞链接试剂盒 PKH26 Red Fluorescent Cell Linker Kit
PKH26荧光细胞连接试剂盒采用采用膜标记技术，能够将带有较长脂质尾巴的黄色-橙色荧光染料结合到细胞膜脂质区域上。
PKH26荧光在黄色-橙色区域（λex=551 nm, λem=567 nm），可用来标记追踪体内外多种细胞。
零售价
0.0
元
市场价
0.0
元
浏览量:
1000
产品编号
PKH26-0.1mL/1000元; 1mL/3600元
数量
-
+
库存:
0
1
产品描述
[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[产品参数, 参数]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]
PKH26 Red Fluorescent Cell Linker Kit
储存条件：避光冷藏，如有结晶需在37℃水浴溶晶。因在乙醇中贮藏，所以要盖紧防挥发。稀释液C：常温或冰箱保存，保持无菌。
亲脂性染料结合到细胞膜上完成标记。染色强度是染料浓度和细胞浓度的函数，与渗透性无关。因此，保证染料添加量不过量非常关键。过标记的细胞将会导致细胞膜完整性缺失和或降低细胞活性。
下列过程可用于体内体外细胞的标记，包括干细胞、淋巴细胞、单核细胞、内皮细胞、神经细胞或者任何其他细胞。体内细胞的标记过程需一定的改进，如血小板的染色，或者选择性标记吞噬细胞。
无菌操作示范步骤（总体积2ml，染色终浓度为2×10-6M PKH26染料和1×107细胞/ml，所有操作在20～25℃）
2. 400×g离心5分钟形成松散的细胞团。注意：PKH26染料不能直接加到离心沉淀中，这样会造成细胞染色不均一和细胞活力降低。
3. 离心后，小心吸弃上层清液，细胞团上剩余液体<25ul。注意：为得到可重复的实验结果，在用稀释液C重悬时，减少残留培养基或缓冲液体积。
4. 加入1mL稀释液C，用移液管轻轻吹打混匀，制备2×细胞悬液。重悬细胞保证完全离散，别震荡，不要让细胞在稀释液C中保存太长时间。
注意：生理盐的存在会使得染料结团并大幅降低染色效率。需确保染色时细胞悬浮于稀释液C中，不含培养基或缓冲盐。
5. 临染色之前，将4μL PKH26乙醇溶液加入1mL稀释液C中，充分混匀，配制的2×染色液（4×10-6M）。
注意1：为减少乙醇对细胞活率的影响，步骤5加入的染料使得步骤6中乙醇最终浓度不能超过1-2%。
注意2：如果所需染料最终浓度＜2×10-6M，需用100%乙醇将PKH26稀释于另一单独的容器中，以确保实验结果的可重复性。
注意：由于染色瞬间完成，快速将细胞与染料混匀对得到明亮、均匀和可重复的标记结果非常重要。为获得最佳效果应采取下述措施：
b. 将2×细胞悬液（步骤4）与2×染色液（步骤5）等体积混合。
c. 调整2×细胞和2×染料的浓度避免染色体积太小（＜100μL）或太大（＞5mL）。
d. 用电动移液器快速将细胞和染料混匀。血清移液管混匀速度太慢而使得染色不均匀。震荡和旋涡震荡混匀同样混匀较慢，染色均一性差。
e. 分配体积尽量准确，以保证样品与样品之间，实验与实验之间的可重复性。
7. 混匀后的染色的细胞25℃孵育的2-5min，定时轻轻颠倒离心管保证在25℃充分混匀。由于染色速度较快，延长孵育时间对实验没有帮助。
8. 加入等体积的血清（2mL）或加入等量血清或1%BSA中止染色反应，孵育1min以结合多余的染料。
注意1：血清（或等效的蛋白浓度）为最优的终止液。如果用完全培养基（含血清的组织培养基）替代，添加体积为10mL。
注意3：不要用无血清培养基或缓冲盐，他们会使染料产生聚集。染料聚集使清洗过程中无法洗净，使得分析过程中仍存在未标记的细胞。
注意1：将重悬液转移至新离心管中，减少了离心管壁残留的染料对洗涤效率的影响；注意2：不要用稀释液C清洗。
10. 最后一步清洗后，用10mL完全培养基重悬细胞评估细胞回收率，细胞活率和荧光强度。离心重悬细胞至所需活细胞浓度。
注意1：染色后的细胞可以用中性甲醛固定，避光条件下，荧光强度至少3周内保持稳定。
注意2：染色荧光强度一般为背景的100-1000倍。虽然染色的CV值与细胞种类有关，但荧光分布应该尽量均匀对称。
11. 荧光显微镜/流式细胞仪分析细胞。检查细胞复苏情况、传代情况及荧光浓度。染色应均匀，比本底荧光高100-1000倍。
1) 本公司所有产品仅限于专业人员用于生命科学研究，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅。
2) 本公司所有产品必须由合格专业技术人员操作同时佩戴口罩/手套/实验服并遵守生物实验室安全操作规程！
产品参数
| Name | PKH26红色荧光细胞链接试剂盒 PKH26 Red Fluorescent Cell Linker Kit | ||
|---|---|---|---|
| CAT# | PKH26 | CAS# | 154214-55-8 |
| Storage# | 4°C Sealed & desiccated & Minimized light exposure | Shelf Life# | 24 months |
| Ex(nm)# | Em(nm)# | ||
| MW# | Solvent# | ||
扫二维码用手机看
The ultimate scientific research that strives for excellence is manifested in the details, forging the beauty of product quality.
Day after day, we persist in the pursuit of innovation. Through dedication, we experience and achieve a leading position in technology.
Room 208, 2nd Floor, Building 2, No. 4 Courtyard, Jinhang West Road, Shunyi District, Beijing
Customer Service hotline：400-686-3443
Email：info@fluorescence.cn